按分離原理的不同,電泳分為 4類:移動(dòng)界面電泳、區(qū)帶電泳、等電聚焦電泳和等速電泳(見(jiàn)圖)。
①移動(dòng)界面電泳是將被分離的離子(如陰離子)混合物置于電泳槽的一端(如負(fù)極),在電泳開(kāi)始前,樣品與載體電解質(zhì)有清晰的界面。電泳開(kāi)始后,帶電粒子向另一極(正極)移動(dòng),泳動(dòng)速度最快的離子走在最前面,其它離子依電極速度快慢順序排列,形成不同的區(qū)帶。只有第一個(gè)區(qū)帶的界面是清晰的,達(dá)到完全分離,其中含有電泳速度最快的離子,其它大部分區(qū)帶重疊(圖a)。
②區(qū)帶電泳是在一定的支持物上,于均一的載體電解質(zhì)中,將樣品加在中部位置,在電場(chǎng)作用下,樣品中帶正或負(fù)電荷的離子分別向負(fù)或正極以不同速度移動(dòng),分離成一個(gè)個(gè)彼此隔開(kāi)的區(qū)帶(圖b )。區(qū)帶電泳按支持物的物理性狀不同,又可分為紙和其它纖維膜電泳、粉末電泳、凝膠電泳與絲線電泳。
③等電聚焦電泳是將兩性電解質(zhì)加入盛有pH梯度緩沖液的電泳槽中,當(dāng)其處在低于其本身等電點(diǎn)的環(huán)境中則帶正電荷,向負(fù)極移動(dòng);若其處在高于其本身等電點(diǎn)的環(huán)境中,則帶負(fù)電向正極移動(dòng)。當(dāng)泳動(dòng)到其自身特有的等電點(diǎn)時(shí),其凈電荷為零,泳動(dòng)速度下降到零,具有不同等電點(diǎn)的物質(zhì)最后聚焦在各自等電點(diǎn)位置,形成一個(gè)個(gè)清晰的區(qū)帶,分辨率極高。
④等速電泳是在樣品中加有領(lǐng)先離子(其遷移率比所有被分離離子的大)和終末離子(其遷移率比所有被分離離子的小),樣品加在領(lǐng)先離子和終末離子之間,在外電場(chǎng)作用下,各離子進(jìn)行移動(dòng),經(jīng)過(guò)一段時(shí)間電泳后,達(dá)到完全分離。被分離的各離子的區(qū)帶按遷移率大小依序排列在領(lǐng)先離子與終末離子的區(qū)帶之間。由于沒(méi)有加入適當(dāng)?shù)闹С蛛娊赓|(zhì)來(lái)載帶電流,所得到的區(qū)帶是相互連接的,且因“ 自身校正”效應(yīng),界面是清晰的,這是與區(qū)帶電泳不同之處。
電泳已日益廣泛地應(yīng)用于分析化學(xué)、生物化學(xué)、臨床化學(xué)、毒劑學(xué)、藥理學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、食品化學(xué)等各個(gè)領(lǐng)域。在直流電場(chǎng)中,帶電粒子向帶符號(hào)相反的電極移動(dòng)的現(xiàn)象稱為電泳(electropho-resis)。1809年俄國(guó)物理學(xué)家Peнce首先發(fā)現(xiàn)了電泳現(xiàn)象,但直到1937年瑞典的Tiselius建立了分離蛋白質(zhì)的界面電泳(boundary electrophoresis)之后,電泳技術(shù)才開(kāi)始應(yīng)用。本世紀(jì)60-70年代,當(dāng)濾紙、聚丙烯酰胺凝膠等介質(zhì)相繼引入電泳以來(lái),電泳技術(shù)得以迅速發(fā)展。豐富多彩的電泳形式使其應(yīng)用十分廣泛。電泳技術(shù)除了用于小分子物質(zhì)的分離分析外,最主要用于蛋白質(zhì)、核酸、酶,甚至病毒與細(xì)胞的研究。由于某些電泳法設(shè)備簡(jiǎn)單,操作方便,具有高分辨率及選擇性特點(diǎn),已成為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中常用的技術(shù)。
電泳又名 —— 電著 ( 著 ) ,泳漆,電沉積。創(chuàng)始于二十世紀(jì)六十年代,由福特汽車公司最先應(yīng)用于汽車底漆。由于其出色的防腐、防銹功能,很快在軍工行業(yè)得到廣泛應(yīng)用。近幾年才應(yīng)用到日用五金的表面處理。由于其優(yōu)良的素質(zhì)和高度環(huán)保,正在逐步替代傳統(tǒng)油漆噴涂。
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